Inmunodetección de anticuerpos pulmonares IgG y Igm contra el SARS-CoV-2 mediante licuefacción enzimática de muestras respiratorias de pacientes de COVID-19

Antonio Clemente, Alejandra Alba-Patiño, Giulia Santopolo y Roberto de la Rica, investigadores del Grupo Multidisciplinar de Sepsis del IdISBa; Estrella Rojo-Molinero y Antonio Oliver , microbiólogos del Hospital Universitario Son Espases; y Marcio Borges, María Aranda y Alberto Del Castillo, investigadors del Grupo Multidisciplinar de Sepsis y médicos de la unidad de sepsis del Hospital Universitario Son Llàtzer, han publicado el artículo con el título "Immunodetection of Lung IgG and IgM Antibodies against SARS-CoV-2 via Enzymatic Liquefaction of Respiratory Samples from COVID-19 Patients" en la revista Analytical Chemistry.

Los anticuerpos IgG e IgM secretados por el pulmón son valiosos biomarcadores para controlar la respuesta inmunitaria local contra las infecciones respiratorias. Estos biomarcadores se encuentran en las secreciones de las vías respiratorias inferiores, que deben licuarse antes del análisis. Los métodos tradicionales para la licuefacción de las muestras se basan en la reducción de los enlaces disulfuro, lo que puede dañar la estructura de los biomarcadores y dificultar su inmunodetección.

Aquí se propone un método enzimático alternativo que utiliza burbujas de O2 generadas por las enzimas catalasas endógenas para licuar las muestras respiratorias. El método propuesto es más eficiente para licuar muestras de media y alta viscosidad y no fragmenta los anticuerpos. Esto evita que se dañen los dominios de reconocimiento del antígeno y los sitios de reconocimiento de los anticuerpos secundarios que pueden disminuir la señal de las técnicas de inmunodetección. La idoneidad del método enzimático para la detección de anticuerpos en muestras respiratorias se ha demostrado mediante la detección de IgG e IgM anti-SARS-CoV-2 frente a la proteína N viral con el estándar de oro ELISA en muestras de aspirado bronquial de una cohorte multicéntrica de 44 pacientes de COVID-19. La detección enzimática aumenta notablemente la sensibilidad hacia la detección de IgG e IgM en comparación con el enfoque tradicional basado en la licuación de las muestras con ditiotreitol. Este rendimiento mejorado podría revelar nuevos mecanismos de la respuesta inmunitaria local temprana contra las infecciones respiratorias que podrían haber pasado desapercibidos con los métodos actuales de tratamiento de muestras.

Referencia del artículo

Clemente A, Alba-Patiño A, Santopolo G, Rojo-Molinero E, Oliver A, Borges M, et al. Immunodetection of Lung IgG and IgM Antibodies against SARS-CoV-2 via Enzymatic Liquefaction of Respiratory Samples from COVID-19 Patients. Anal Chem. 2021;93(12):5259-66. doi: 10.1021/acs.analchem.1c00251. PubMed PMID:33733739.

Enlaces Bibliosalut |